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PA0552 Rev B
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• Consultare la normativa nazionale, regionale o locale vigente per lo smaltimento dei componenti potenzialmente tossici.
• Ridurre al minimo la contaminazione microbica dei reagenti per evitare il rischio di una colorazione non specica.
• Tempi o temperature di incubazione o di riconoscimento diversi da quelli specicati possono fornire risultati erronei. Ogni eventuale
modica deve essere validata dall’utente.
Istruzioni per l’uso
L’anticorpo primario Pax-5 (1EW) è stato sviluppato per essere utilizzato con il sistema automatizzato Bond in associazione con il Bond
Polymer Rene Detection. L’impiego del Peroxide Block come prima fase dell’IHC Staining Protocol F inuisce sulla colorazione che
si ottiene con questo anticorpo; per questo motivo il protocollo di colorazione consigliato per il Pax-5 (1EW) è una versione modicata
dell’IHC Staining Protocol F, nella quale la fase del Peroxide Block prima del MARKER è stata eliminata ed è stata inserita una fase di
blocco con il Peroxide Block il MARKER. Questo protocollo di colorazione modicato deve essere creato dall’utente. Per le istruzioni su
come modicare i protocolli consultare “Aggiunta e rimozione delle fasi del protocollo” nella documentazione per l’utente Bond. Per lo
smascheramento termoindotto dell’epitopo si consiglia l’uso della Bond Epitope Retrieval Solution 2 per 20 minuti.
Risultati attesi
Tessuti normali
Il Pax-5 è un fattore di trascrizione nucleare specico dei linfociti B, espresso nei prolinfociti B, nei linfociti pre-B e nei linfociti B maturi.
Il clone 1EW ha rilevato la proteina Pax-5 nei linfociti B follicolari e non follicolari della tonsilla (3/3), della milza (3/3), del colon (3/3) e
dell’intestino tenue (3/3). La colorazione di qualche linfocito B è stata osservata occasionalmente anche in diversi altri tessuti (33/69),
tra i quali surrene, rene, esofago, stomaco, fegato, pancreas, polmone, cute, prostata, cervice uterina, mammella, tiroide, timo, midollo
osseo e iposi (n= ).
Tessuti tumorali
Il clone 1EW ha colorato 14/14 linfomi diffusi a grandi cellule B, 6/6 linfomi centrofollicolari, 3/3 MALTomi, 1/1 linfoma a cellule del
mantello, 1/1 linfoma di Burkitt, 1/1 linfoma a cellule B ricco in cellule T, 5/5 linfomi di Hodgkin e 0/11 linfomi a cellule T. Nessuna
colorazione è stata osservata in diverse altre neoplasie non ematologiche (n=41).
Si raccomanda l’uso del Pax-5 (1EW) come parte di un gruppo di anticorpi per l’identicazione delle neoplasie che traggono origine dai
linfociti B.
Limitazioni speciche del prodotto
Il Pax-5 (1EW) è stato ottimizzato da Leica Biosystems per l’uso con il Bond Polymer Rene Detection e con i reagenti ausiliari Bond.
Gli utenti che modicano le procedure raccomandate devono assumersi la responsabilità dell’interpretazione dei risultati relativi ai
pazienti in tali circostanze. I tempi del protocollo possono variare in base alle variazioni nella ssazione del tessuto e nell’efcienza del
potenziamento dell’antigene e devono essere deniti in modo empirico. Nell’ottimizzazione delle condizioni di riconoscimento e dei tempi
del protocollo si devono impiegare dei controlli negativi del reagente .
Soluzione problemi
Per i provvedimenti consultare il riferimento bibliograco n. 3.
Per riferire una colorazione inusuale rivolgersi al distributore locale o all’ufcio di zona di Leica Biosystems.
Ulteriori informazioni
Ulteriori informazioni sull’immunocolorazione con i reagenti Bond si trovano in “Uso dei reagenti Bond” nella documentazione per
l’utente Bond, ai titoli Principio della procedura, Materiali necessari, Preparazione del campione, Controllo di qualità, Verica del saggio,
Interpretazione della colorazione, Leggenda dei simboli e delle etichette e Limitazioni generali.
Bibliograa
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Hansson M, Jerkeman M and Dictor M. Biphenotypic bigenotypic lymphoma with simultaneous expression of PAX5/BSAP and B- and
T-cell markers. European Journal of Haematology. 2007; 79:159–165.
ProClin
™
950 è un marchio di fabbrica di Supelco, società del gruppo Sigma-Aldrich.
Data di pubblicazione
05 febbraio 2013