PA0552 Rev B
Page 19
• Mikrobiel kontaminering af reagenser skal minimeres for at undgå en øget uspecik farvning.
• Gennding og inkubationstider eller -temperaturer, som afviger fra de specicerede, kan give fejlagtige resultater. Enhver ændring
heraf skal valideres af brugeren.
Brugsanvisning
Pax-5 (1EW) primært antistof er udviklet til brug på det automatiske Bond-system sammen med Bond Polymer Rene Detection.
Anvendelsen af Peroxide Block som første trin i IHC-farvningsprotokol F vil påvirke den farvning, der er opnået med dette antistof, derfor
er den anbefalede farvningsprotokol for Pax-5 (1EW) en tilpasset version af IHC-farvningsprotokol F, hvor trinnet med Peroxide Block
før MARKER er slettet og et peroxide block trin er indsat efter MARKER. Den modicerede farvningsprotokol skal oprettes af brugeren.
For vejledning om tilpasning af protokoller henvises til “Tilføjelse og fjernelse af protokoltrin” i Bond brugervejledningen. Varmeinduceret
epitopgennding anbefales ved anvendelse af Bond Epitope Retrieval Solution 2 i 20 minutter.
Forventede resultater
Normalt væv
Pax-5 er en B-celle-specik nukleær transkriptionsfaktor, som udtrykkes i pro-B-, præ-B- og modne B-celler. Klon 1EW detekterede
Pax-5-proteinet i follikulære og non-follikulære B-celler fra tonsil 3/3, milt 3/3, colon 3/3 og tyndtarm 3/3. Farvning af lejlighedsvise
B-lymfocytter sås også i en række andre væv 33/69, herunder binyre, nyre, øsofagus, gaster, lever, pancreas, lunge, hud, prostata,
cervix, mamma, thyreoidea, thymus, knoglemarv og hypofyse.
Tumorvæv
Klon 1EW farvede 14/14 diffust storcellede B-cellelymfomer, 6/6 follikelcenterlymfomer, 3/3 MALTomer, 1/1 mantlecellelymfom, 1/1
Burkitts lymfom, 1/1 T-cellerigt B-cellelymfom, 5/5 Mb. Hodgkin og 0/11 T-cellelymfomer. Der sås ingen farvning i en række non-
hæmatologiske maligniteter (n=41).
Pax-5 (1EW) anbefales at indgå i et panel af antistoffer til identikation af maligne lidelser af B-celle-oprindelse.
Produktspecikke begrænsninger
Pax-5 (1EW) er optimeret af Leica Biosystems til brug med Bond Polymer Rene Detection og Bond hjælpereagenser. Brugere, som
afviger fra de anbefalede undersøgelsesprocedurer, må under disse forhold selv tage ansvaret for fortolkningen af patientresultater.
Protokoltiderne kan variere på grund af variation i vævsksering og effektiviteten i antigenfremhævning og skal bestemmes empirisk. Der
skal anvendes negative reagenskontroller ved optimering af genndingsforhold og protokoltider.
Fejlnding
Se reference 3 for afhjælpende foranstaltninger.
Kontakt venligst den lokale distributør eller Leica Biosystems’ regionale kontor for at rapportere usædvanlig farvning.
Yderligere oplysninger
Yderligere oplysninger om immunfarvning med Bond-reagenser kan ndes i “Anvendelse af Bond-reagenser” i Bond-brugervejledningen
under overskrifterne Proceduremæssige principper, Nødvendige materialer, Præparatklargøring, Kvalitetskontrol, Analyseverikation,
Fortolkning af farvning, Nøgle til symboler på etiketter og Generelle begrænsninger.
Bibliogra
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Hansson M, Jerkeman M and Dictor M. Biphenotypic bigenotypic lymphoma with simultaneous expression of PAX5/BSAP and B- and
T-cell markers. European Journal of Haematology. 2007; 79:159–165.
ProClin
™
950 er et varemærke tilhørende Supelco, en del af Sigma-Aldrich Corporation.
Udgivelsesdato
05 februar 2013