PA0552 Rev B
Page 17
• Ο χειρισμός των δειγμάτων, πριν και μετά τη μονιμοποίηση και όλων των υλικών που εκτίθενται σε αυτά, θα πρέπει να γίνεται ως
εάν ήταν ικανά να μεταδώσουν μόλυνση και θα πρέπει να απορρίπτονται λαμβάνοντας κατάλληλες προφυλάξεις
2
. Μην κάνετε
ποτέ αναρρόφηση αντιδραστηρίων με πιπέτα με το στόμα και αποφύγετε να έρθει σε επαφή το δέρμα και οι βλεννογόνοι με τα
αντιδραστήρια ή τα δείγματα. Αν αντιδραστήρια ή δείγματα έρθουν σε επαφή με ευαίσθητες περιοχές, πλύνετέ τις με άφθονο νερό.
Ζητήστε ιατρική συμβουλή.
• Συμβουλευτείτε τους ομοσπονδιακούς, πολιτειακούς ή τοπικούς κανονισμούς για απόρριψη τυχόν δυνητικώς τοξικών συστατικών.
• Ελαχιστοποιήστε τη μικροβιακή μόλυνση των αντιδραστηρίων, διότι ενδέχεται να συμβεί αύξηση μη ειδικής χρώσης.
• Ανάκτηση, χρόνοι επώασης ή θερμοκρασίες διαφορετικές από τις καθορισμένες, μπορεί να οδηγήσουν σε εσφαλμένα αποτελέσματα.
Οποιαδήποτε τέτοια αλλαγή πρέπει να επικυρώνεται από τον χρήστη.
Οδηγίες χρήσης
Το πρωτογενές αντίσωμα Pax-5 (1EW) αναπτύχθηκε για χρήση στο αυτοματοποιημένο σύστημα Bond σε συνδυασμό με το Bond
Polymer Rene Detection. Η χρήση του Peroxide Block ως το πρώτο βήμα στο ανοσοϊστοχημικό πρωτόκολλο χρώσης IHC Staining
Protocol F θα επηρεάσει την χρώση που επιτυγχάνεται με αυτό το αντίσωμα. Για το λόγο αυτό, το συνιστώμενο πρωτόκολλο χρώσης
για το Pax-5 (1EW) είναι μια τροποποιημένη εκδοχή του IHC Staining Protocol F, όπου το βήμα Peroxide Block πριν το MARKER
έχει διαγραφεί και έχει εισαχθεί ένα βήμα Peroxide Block μετά το MARKER. Αυτό το τροποποιημένο πρωτόκολλo xρώσης πρέπει
να δημιουργηθεί από τον χρήστη. Για οδηγίες για τον τρόπο τροποποίησης πρωτοκόλλων ανατρέξτε στην ενότητα “Προσθήκη και
αφαίρεση βημάτων πρωτοκόλλων “ στο υλικό τεκμηρίωσης χρήσης του Bond. Συνιστάται ανάκτηση επιτόπου επαγόμενη με θερμότητα
χρησιμοποιώντας το Bond Epitope Retrieval Solution 2 για 20 λεπτά.
Αναμενόμενα αποτελέσματα
Φυσιολογικοί ιστοί
Το Pax-5 είναι ένας πυρηνικός παράγων μεταγραφής ειδικός των B κυττάρων που εκφράζεται σε προ-Β (pro-B), πρε-Β (pre-B) και
ώριμα B κύτταρα. Ο κλώνος 1EW ανίχνευσε την πρωτεΐνη Pax-5 σε θυλακιώδη και μη θυλακιώδη κύτταρα B αμυγδαλής 3/3, σπλήνα
3/3, κόλου 3/3 και λεπτού εντέρου 3/3. Χρώση περιστασιακών B λεμφοκυττάρων παρατηρήθηκε επίσης σε μια ποικιλία άλλων ιστών
33/69, συμπεριλαμβανομένων του επινεφριδίου, νεφρού, οισοφάγου, στομάχου, ήπατος, παγκρέατος, πνεύμονα, δέρματος, προστάτη,
τραχήλου, μαστού, θυρεοειδή, θύμου, μυελού των οστών και υπόφυσης.
Νεοπλασματικοί ιστοί
Με τον κλώνο 1EW χρώστηκαν 14/14 διάχυτα λεμφώματα εκ μεγάλων κυττάρων B, 6/6 λεμφοζιδιακά λεμφώματα, 3/3 λεμφώματα MALT,
1/1 λέμφωμα από το κύτταρο του μανδύα, 1/1 λέμφωμα Burkitt, 1/1 B κυτταρικό λέμφωμα πλούσιο σε Τ-κύτταρα, 5/5 νόσοι του Hodgkin
και 0/11 λεμφώματα κυττάρων T. Δεν παρατηρήθηκε χρώση σε μια ποικιλία μη αιματολογικών κακοηθειών (n=41).
Το Pax-5 (1EW) συνιστάται για χρήση ως τμήμα ομάδας αντισωμάτων για την αναγνώριση των κακοηθειών με προέλευση εκ Β
κυττάρων.
Ειδικοί περιορισμοί του προϊόντος
Το Pax-5 (1EW) έχει βελτιστοποιηθεί στην Leica Biosystems για χρήση με το Bond Polymer Rene Detection και τα βοηθητικά
αντιδραστήρια Bond. Οι χρήστες που παρεκκλίνουν από τις συνιστώμενες διαδικασίες εξέτασης, πρέπει να αναλάβουν την ευθύνη
για την ερμηνεία των αποτελεσμάτων των ασθενών υπό αυτές τις συνθήκες. Οι χρόνοι του πρωτοκόλλου μπορεί να διαφέρουν λόγω
της διαφοροποίησης στη μονιμοποίηση του ιστού και την αποτελεσματικότητα της ενίσχυσης του αντιγόνου και συνεπώς πρέπει
να προσδιορίζονται εμπειρικά. Για τη βελτιστοποίηση των συνθηκών ανάκτησης και των χρόνων του πρωτοκόλλου θα πρέπει να
χρησιμοποιούνται δείγματα αντιδραστηρίου αρνητικού ελέγχου.
Αντιμετώπιση προβλημάτων
Ανατρέξτε στην παραπομπή 3 για τις διορθωτικές ενέργειες.
Για να αναφέρετε περιπτώσεις ασυνήθιστης χρώσης, επικοινωνήστε με τον τοπικό σας διανομέα ή τα περιφερειακά γραφεία της Leica
Biosystems.
Πρόσθετες πληροφορίες
Μπορείτε να βρείτε περισσότερες πληροφορίες σχετικά με την ανοσοχρώση με αντιδραστήρια Bond, υπό τους τίτλους “Αρχή της
διαδικασίας”, “Απαιτούμενα υλικά”, “Προετοιμασία δείγματος”, “Ποιοτικός έλεγχος”, “Επαλήθευση προσδιορισμού”, “Ερμηνεία της
χρώσης”, “Υπόμνημα για τα σύμβολα στις ετικέτες” και “Γενικοί περιορισμοί” στην ενότητα “Χρήση αντιδραστηρίων Bond” στο υλικό
τεκμηρίωσης χρήσης του Bond.
Bιβλιογραφία
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Hansson M, Jerkeman M and Dictor M. Biphenotypic bigenotypic lymphoma with simultaneous expression of PAX5/BSAP and B- and
T-cell markers. European Journal of Haematology. 2007; 79:159–165.
Το ProClin
™
950 είναι εμπορικό σήμα της Supelco, τμήμα της Sigma-Aldrich Corporation.
Ημερομηνία έκδοσης
05 Φεβρουαρίου 2013