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PA0552 Rev B
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• Behandeln Sie Präparate vor und nach der Fixierung sowie sämtliche damit in Berührung kommenden Materialien so, als ob diese
Infektionen übertragen können und entsorgen Sie sie unter Beachtung der entsprechenden Vorsichtsmaßnahmen
2
. Pipettieren Sie
Reagenzien niemals mit dem Mund und vermeiden Sie den Kontakt von Haut und Schleimhäuten mit Reagenzien oder Präparaten.
Falls Reagenzien oder Präparate mit empndlichen Bereichen in Kontakt gekommen sind, spülen Sie diese mit reichlich Wasser.
Holen Sie anschließend ärztlichen Rat ein.
• Beachten Sie bei der Entsorgung potentiell toxischer Bestandteile die behördlichen und örtlichen Vorschriften.
• Mikrobielle Kontaminationen sollten minimiert werden, da es sonst zu einer Zunahme unspezischer Färbungen kommen kann.
• Die Verwendung anderer als den angegebenen Retrievals, Inkubationszeiten oder Temperaturen kann zu fehlerhaften Ergebnissen
führen. Diesbezügliche Änderungen müssen vom Anwender selbst getestet werden.
Gebrauchsanleitung
Der Primärantikörper Pax-5 (1EW) wurde für die Verwendung mit dem automatischen Bond-System in Verbindung mit dem Bond
Polymer Rene Detection entwickelt. Durch die Verwendung von Peroxide Block im ersten Schritt des IHC Protocol F wird die mit
diesem Antikörper erreichte Färbung beeinträchtigt. Aus diesem Grund ist das empfohlene Färbeprotokoll für Pax-5 (1EW) eine
angepasste Version des IHC-Färbeprotokolls F, bei dem der Schritt mit Peroxide Block vor dem MARKER gelöscht und nach dem
MARKER ein Schritt zum Peroxide Block eingefügt wurde. Dieses modizierte Färbeprotokoll muss vom Benutzer erstellt werden.
Informationen zum Bearbeiten von Protokollen nden Sie im Abschnitt “Hinzufügen und Entfernen von Protokollschritten” in Ihrem
Bond-Benutzerhandbuch. Das hitzeinduzierte Epitop-Retrieval wird unter Verwendung der Bond Epitope Retrieval Solution 2 für 20
Minuten empfohlen.
Erwartete Ergebnisse
Normale Gewebe
Pax-5 ist ein B-Zell-spezischer nukleärer Transkriptionsfaktor, der in Pro-B-, Prä-B- und reifen B-Zellen exprimiert wird. Klon 1EW
erkannte das Pax-5-Protein in follikulären und nicht follikulären B-Zellen der Tonsillen (3/3), Milz (3/3) und des Dünndarms (3/3).
Eine Färbung von vereinzelten B-Lymphozyten wurde auch in verschiedenen anderen Geweben beobachtet (33/69), darunter in der
Nebenniere, Niere, Speiseröhre, dem Magen, der Leber, dem Pankreas, der Lunge, Haut, Prostata, Cervix, Mamma, Schilddrüse, dem
Thymus, Knochenmark und der Hypophyse.
Tumorgewebe
Klon 1EW färbte 14/14 diffusen großzelligen B-Zell-Lymphomen, 6/6 follikulären Lymphomen, 3/3 MALTomen, 1/1 Mantelzell-Lymphom,
1/1 Burkitt-Lymphom, 1/1 T-Zell-reichen B-Zell-Lymphom, 5/5 Hodgkin-Lymphomen und 0/11 T-Zell-Lymphomen. Bei verschiedenen
anderen nicht-hämatologischen Malignitäten wurde keine Färbung beobachtet (n=41).
Pax-5 (1EW) wird zur Verwendung als Teil einer Reihe von Antikörpern zur Identizierung von Malignitäten mit B-Zell-Herkunft
empfohlen.
Produktspezische Einschränkungen
Pax-5 (1EW) wurde von Leica Biosystems zur Verwendung mit dem Bond Polymer Rene Detection und Bond-Zusatzreagenzien
optimiert. Anwender, die andere als die empfohlenen Testverfahren verwenden, müssen unter diesen Umständen die Verantwortung
für die Auswertung der Patientenergebnisse übernehmen. Die Verfahrenszeiten können aufgrund von Unterschieden in der
Gewebexierung und der Wirksamkeit der Antigenverstärkung variieren und müssen empirisch bestimmt werden. Bei der Optimierung
der Retrieval-Bedingungen und Verfahrenszeiten sollten negative Reagenzkontrollen eingesetzt werden.
Fehlersuche
Maßnahmen zur Abhilfe beim Auftreten von Fehlern nden Sie in Referenz 3.
Falls Sie ungewöhnliche Färbeergebnisse beobachten, wenden Sie sich an Ihre örtliche Vertriebsrma oder an die
Regionalniederlassung von Leica Biosystems.
Weitere Informationen
Weitere Informationen zur Immunfärbung mit Bond-Reagenzien nden Sie in den Abschnitten Grundlegende Vorgehensweise,
Erforderliches Material, Probenvorbereitung, Qualitätskontrolle, Assay-Verizierung, Deutung der Färbung, Schlüssel der Symbole auf
den Etiketten und Allgemeine Einschränkungen in “Das Arbeiten mit Bond-Reagenzien” in Ihrem Bond-Benutzerhandbuch.
Bibliograe
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Hansson M, Jerkeman M and Dictor M. Biphenotypic bigenotypic lymphoma with simultaneous expression of PAX5/BSAP and B- and
T-cell markers. European Journal of Haematology. 2007; 79:159–165.
ProClin
™
950 ist eine Marke von Supelco, einem Unternehmen der Sigma-Aldrich Corporation.
Ausgabedatum
05 Februar 2013