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PA0552 Rev B
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• As amostras, antes e depois da xação, e todo o material que a elas seja exposto, devem ser manipulados como se fossem capazes
de transmitir infecção e eliminados usando as precauções adequadas
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. Nunca pipete reagentes com a boca e evite o contacto entre
a pele e membranas mucosas com reagentes ou amostras. Se reagentes ou amostras entrarem em contacto com os olhos, lave-os
com uma quantidade abundante de água. Consultar um médico.
• Consulte os regulamentos federais, estatais e locais relativamente à eliminação de quaisquer componentes potencialmente tóxicos.
• Minimize a contaminação microbiana dos reagentes ou poderá ocorrer um aumento da coloração inespecíca.
• A utilização de tempos e temperaturas de recuperação e incubação diferentes dos especicados pode produzir resultados erróneos.
Qualquer alteração deste tipo deve ser validada pelo utilizador.
Instruções de utilização
O anticorpo primário Pax-5 (1EW) foi desenvolvido para utilização no sistema Bond automatizado em combinação com a Bond Polymer
Rene Detection. A utilização do Peroxide Block como o primeiro passo no Protocolo de Coloração IHC F irá afectar a coloração
obtida com este anticorpo, pelo que o protocolo de coloração recomendado para Pax-5 (1EW) consiste numa versão editada do IHC
Protocol F, em que o passo do Peroxide Block antes do MARKER foi apagado e inserido um bloco de bloqueio com peroxide depois
do MARKER. O protocolo de coloração modicado tem que ser criado pelo utilizador. Para instruções sobre como editar os protocolos,
Consulte “Adicionar e remover passos do protocolo” na sua documentação do utilizador Bond. Recomenda-se a recuperação de
epitopos induzida por calor utilizando a Bond Epitope Retrieval Solution 2 durante 20 minutos.
Resultados esperados
Tecidos normais
Pax-5 consiste num factor de transcrição nuclear especíco para linfócitos B que é expresso em linfócitos pró-B, pré-B e B maduros.
O Clone 1EW detectou a proteína Pax-5 em linfócitos B foliculares e não foliculares da amígdala 3/3, baço 3/3, cólon 3/3 e intestino
delgado 3/3. Também se observou uma coloração ocasional de linfócitos B numa ampla variedade outros tecidos 33/69, incluindo supra-
renal, rim, esófago, estômago, fígado, pâncreas, pulmão, pele, próstata, colo do útero, mama, tiróide, timo, medula óssea e pituitária.
Tecidos tumorais
O clone 1EW corou 14/14 linfomas difusos B, 6/6 linfomas de centro folicular, 3/3 MALTomas, 1/1 linfomas de células do manto, 1/1
linfoma de Burkitt, 1/1 linfoma B rico em linfócitos T, 5/5 casos de doença de Hodgkin e 0/11 linfomas T. Não foi observada coloração em
várias outras doenças malignas não hematológicas (n=41).
Pax-5 (1EW) está recomendado para utilização como parte de um painel de anticorpos para a identicação de doenças malignas com
origem nos linfócitos B.
Limitações Especícas para o Produto
Pax-5 (1EW) foi optimizado na Leica Biosystems para utilização com Bond Polymer Rene Detection e reagentes auxiliares Bond.
Utilizadores que se desviem dos procedimentos de teste recokmendados devem assumir a responsabilidade pela interpretação dos
resultados dos doentes nestas circunstâncias. Os tempos de protocolo podem variar, devido a variações na xação tecidular e na
ecácia de valorização com antigénios, devendo ser determinados de forma empírica. Os controlos de reagente negativos devem ser
usados quando se optimizam as condições de recuperação e os tempos do protocolo.
Resolução de problemas
Consulte a referência 3 para acções de resolução.
Entre em contacto com o seu distribuidor local ou com a sucursal regional da Leica Biosystems para noticar qualquer coloração pouco
habitual.
Informações Adicionais
Poderá encontrar informações adicionais sobre imunocoloração com reagentes Bond nas secções de Princípios do Procedimento,
Material Necessário, Preparação da Amostra, Controlo de Qualidade, Vericação do Ensaio, Interpretação da Coloração, Signicado
dos Símbolos nos Rótulos e Limitações Gerais em “Utilizar os Reagentes Bond”na sua documentação do utilizador Bond.
Bibliograa
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Hansson M, Jerkeman M and Dictor M. Biphenotypic bigenotypic lymphoma with simultaneous expression of PAX5/BSAP and B- and
T-cell markers. European Journal of Haematology. 2007; 79:159–165.
ProClin
™
950 é uma marca registada de Supelco, parte da Sigma-Aldrich Corporation.
Data de Emissão
05 de Fevereiro de 2013