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PA0027
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• I campioni, prima e dopo la ssazione, e tutti i materiali esposti ad essi devono essere manipolati come potenziali vettori di infezione
e smaltiti con le opportune precauzioni
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. Non pipettare mai i reagenti con la bocca ed evitare il contatto dei reagenti e dei campioni
con la cute e le mucose. Se un reagente o un campione viene a contatto con zone sensibili, lavare abbondantemente con acqua.
Consultare un medico.
• Consultare la normativa nazionale, regionale o locale per lo smaltimento dei componenti potenzialmente tossici.
• Ridurre al minimo la contaminazione microbica dei reagenti per non incrementare il rischio di una colorazione non specica.
• Tempi o temperature di incubazione o di riconoscimento diversi da quelli specicati possono fornire risultati erronei. Ogni eventuale
modica deve essere convalidata dall’utente.
Istruzioni per l’uso
Si raccomanda di utilizzare l’anticorpo primario Melanoma Marker (HMB45) su un sistema Bond automatizzato in associazione con
Bond Polymer Rene Detection (DS9800) o Bond Polymer Rene Red Detection (DS9390). I protocolli di colorazione raccomandati per
l’anticorpo primario Melanoma Marker (HMB45) sono IHC Protocol F se si utilizza Bond Polymer Rene Detection e IHC Protocol J se si
utilizza Bond Polymer Rene Red Detection. Si consiglia il pretrattamento enzimatico con il Bond Enzyme 1 per 5 minuti.
Risultati attesi
Tessuti normali
Il Melanoma Marker (HMB45) ha mostrato colorazione citoplasmatica, granulare positiva in melanociti nello strato basale
dell’epidermide. Tutti i tessuti normali erano negativi. (Numero totale di casi colorati = 99).
Tessuti tumorali
Il Melanoma Marker (HMB45) ha colorato melanomi maligni (13/13). Non si è osservata nessuna colorazione in una serie di altri tumori.
(Numero totale di casi colorati = 101).
Si raccomanda di utilizzare il Melanoma Marker (HMB45) come parte di un pannello di anticorpi per la diagnosi di melanomi.
Limitazioni speciche del prodotto
Si raccomanda di utilizzare il Melanoma Marker (HMB45) con Bond Polymer Rene Detection o Bond Polymer Rene Red Detection e
reagenti sussidiari Bond. Gli utenti che modicano le procedure raccomandate devono assumersi la responsabilità dell’interpretazione
dei risultati relativi ai pazienti in tali circostanze. I tempi del protocollo possono variare in base alle variazioni nella ssazione del tessuto
e nell’efcienza del potenziamento dell’antigene e devono essere deniti in modo empirico. Nell’ottimizzazione delle condizioni di
riconoscimento e dei tempi del protocollo si devono impiegare dei controlli negativi del reagente.
Soluzione problemi
Per i provvedimenti consultare il riferimento bibliograco n. 3.
Per riferire una colorazione inusuale rivolgersi al distributore locale o all’ufcio di zona di Leica Biosystems.
Ulteriori informazioni
Ulteriori informazioni sull’immunocolorazione con i reagenti Bond si trovano in “Uso dei reagenti Bond” nella documentazione per
l’utente Bond, ai titoli Principio della procedura, Materiali necessari, Preparazione del campione, Controllo di qualità, Verica del saggio,
Interpretazione della colorazione, Leggenda dei simboli e delle etichette e Limitazioni generali.
Bibliograa
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Kapur RP, Bigler SA, Skelly M, et al. Anti-melanoma monoclonal antibody HMB45 identies an oncofetal glycoconjugate associated
with immature Melanoma Markers. The Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 1992; 40(2):207-212.
5. Gown AM, Vogel AM, Hoak D, et al. Monoclonal antibodies specic for melanocytic tumours distinguish subpopulations of
melanocytes. American Journal of Pathology. 1986;123(2):195-203.
ProClin
™
950 è un marchio di fabbrica di Supelco, società del gruppo Sigma-Aldrich.
Data di pubblicazione
09 maggio 2013