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PA0027
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• Pour obtenir un exemplaire de la che technique des substances dangereuses (Material Safety Data Sheet), contactez votre
distributeur local ou le bureau régional de Leica Biosystems, ou consultez le site Web de Leica Biosystems :
www.LeicaBiosystems.com
• Les échantillons, avant et après xation, et tous les matériels ayant été en contact avec eux, doivent être manipulés comme s’ils
étaient à risque infectieux et éliminés avec les précautions adéquates
2
. Ne jamais pipeter les réactifs à la bouche et éviter le contact
de la peau et des muqueuses avec les réactifs ou les échantillons. Si des réactifs ou des échantillons entrent en contact avec des
zones sensibles, rincer abondamment à l’eau. Consultez un médecin.
• Renseignez-vous sur les règlements fédéraux, nationaux et locaux pour l’élimination des composés potentiellement toxiques.
• Éviter une contamination microbienne des réactifs, qui peut favoriser un marquage non spécique.
• Des durées ou des températures de démasquage ou d’incubation autres que celles spéciées peuvent entraîner des résultats
erronés. Tout changement doit être validé par l’utilisateur.
Mode d’Emploi
L’anticorps primaire Melanoma Marker (HMB45) est recommandé pour être utilisé sur un système Bond automatisé en combinaison
avec le Bond Polymer Rene Detection (DS9800) ou le Bond Polymer Rene Red Detection (DS9390). Les protocoles de coloration
recommandés pour l’anticorps primaire Melanoma Marker (HMB45) sont l’IHC Protocol F pour l’utilisation du Bond Polymer Rene
Detection et l’IHC Protocol J pour l’utilisation du Bond Polymer Rene Red Detection. Un prétraitement enzymatique est recommandé en
utilisant Bond Enzyme 1 pendant 5 minutes.
Résultats Attendus
Tissus Sains
Le Melanoma Marker (HMB45) a présenté une coloration cytoplasmique granulaire positive dans les mélanocytes de la couche basale
de l’épiderme. Tous les autres tissus normaux étaient négatifs. (Nombre total de cas colorés = 99).
Tissus Tumoraux
Le Melanoma Marker (HMB45) a coloré 13/13 mélanomes malins. Aucune coloration n’a été observée dans les autres tumeurs.
(Nombre total de cas colorés = 101).
Melanoma Marker (HMB45) est recommandé pour être utilisé en tant que composant d’un panel d’anticorps pour le diagnostic
de mélanomes.
Limites Spéciques du Produit
Melanoma Marker (HMB45) est recommandé pour être utilisé soit avec le Bond Polymer Rene Detection ou le Bond Polymer Rene
Red Detection et les réactifs auxiliaires Bond. Les utilisateurs qui s’écartent des procédures recommandées prennent la responsabilité
de l’interprétation des résultats des patients dans ces conditions. Les durées du protocole peuvent varier, en raison des variations de
xation des tissus et de l’efcacité de la facilitation de l’antigène, et doivent être déterminées empiriquement. Des contrôles réactif
négatifs doivent être testés lors de l’optimisation des conditions de démasquage et des durées du protocole.
Identication des Problèmes
Voir la référence 3 pour connaître les mesures correctives.
Prenez contact avec votre distributeur local ou avec le bureau régional de Leica Biosystems pour signaler tout marquage inattendu.
Informations Complémentaires
Des informations complémentaires sur l’immunomarquage avec les réactifs Bond, les principes de la méthode, le matériel nécessaire, la
préparation des échantillons, le contrôle qualité, les vérications d’analyse, l’interprétation du marquage, les légendes et symboles sur
les étiquettes et les limites générales, peuvent être obtenues dans “Utilisation des réactifs Bond” dans votre manuel d’utilisation Bond.
Bibliographie
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Kapur RP, Bigler SA, Skelly M, et al. Anti-melanoma monoclonal antibody HMB45 identies an oncofetal glycoconjugate associated
with immature Melanoma Markers. The Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 1992; 40(2):207-212.
5. Gown AM, Vogel AM, Hoak D, et al. Monoclonal antibodies specic for melanocytic tumours distinguish subpopulations of
melanocytes. American Journal of Pathology. 1986;123(2):195-203.
ProClin
™
950 est une marque commerciale de Supelco, membre du groupe Sigma-Aldrich Corporation.
Date de Publication
09 mai 2013